1 系統(tǒng)的組成和工作原理
本系統(tǒng)由基本PCR部分、熒光檢測部分和上位計算機部分等組成高效節能。
基本PCR部分是該儀器的基礎(chǔ)構建,包括加熱絲、溫度采集與處理等部分近年來,它必須具有控溫講道理、快速升降溫、溫度場均一等PCR儀的基本要求技術先進,保證PCR過程的順利完成落地生根。
熒光檢測部分包括激勵光源、光電倍增管健康發展、信號采集與處理等部分有效保障。
上位計算機部分包括數(shù)據(jù)采集和系統(tǒng)分析軟件,主要負責從下位機采集數(shù)據(jù)長效機製,形成實時圖形相結合,并進行數(shù)據(jù)處理和圖形分析,得到目標DNA片段的含量和其它檢測報告信息等製高點項目。
工作時為產業發展,主計算機首先投入運行,同時工作人員把所測樣品放入PCR反映腔體的樣品架上有所增加,工作人員根據(jù)所測樣品的PCR反應(yīng)條件設(shè)置相應(yīng)的溫度參數(shù)各項要求、控溫時間以及循環(huán)次數(shù)等,接著工作人員點擊相應(yīng)的按鈕控件越來越重要的位置,系統(tǒng)就進入快速升溫新技術、恒溫、快速降溫順滑地配合、恒溫等PCR循環(huán)過程深入,直至所有的循環(huán)結(jié)柬,同時在每一循環(huán)的低溫段恒溫結(jié)柬前系統(tǒng)進行樣品的熒光信號實時采集前沿技術,主計算機根據(jù)采集到的信號形成實時圖形基礎,并進行數(shù)據(jù)處理和圖形分析性能,得到目標DNA片段的含量和其它檢測報告信息等。
2 系統(tǒng)的硬件設(shè)計
系統(tǒng)的硬件主要由溫度信號采集處理部分對外開放、熒光信號采集處理部分技術創新、單片微機控制系統(tǒng)部分、驅(qū)動電路部分以及計算機系統(tǒng)等組成資料。
2.1 溫度信號采集處理部分
這一部分包括溫度傳感器廣泛應用、傳感器接口電路以及信號放大電路,在這里溫度傳感器采用熱電偶橫向協同,由于熱電偶通過微小電壓進行溫度測量哪些領域,容易受干擾,在具體的設(shè)計中不斷創新,干擾問題往往很難一下拿出明確的解決方案積極,要根據(jù)干擾的種類找原因,對癥下藥生產創效。在本設(shè)計中結構,主要采取了以下的抗干擾措施,Roche_Light Cycler 480II熒光定量PCR儀保證溫度采集的準確性:(1)在熱電偶的輸出端追加濾波電容;(2)加變送器優化上下,利用熱電偶的接口芯片能力建設,把溫度信號直接轉(zhuǎn)換成電壓信號,這個信號不易受干擾生產體系。
2.2 熒光信號采集處理部分
熒光信號采集處理部分主要包括光檢測系統(tǒng)和信號采樣處理系統(tǒng)兩部分服務。
2.2.1 光檢測系統(tǒng)
光檢測系統(tǒng)主要包括光源(待測樣品)、濾光片能力和水平、光電倍增管以及敏感度選擇電路等覆蓋。微處理器在檢測過程中,按光檢測值大小動態(tài)調(diào)整電位器輸出研究,改變光電倍增管控制電壓板的電壓輸入高效,自動調(diào)整光電倍增管測量靈敏度。
光電倍增管采用H5783型倍增管提高,它具有如下特性:
(1)結(jié)構(gòu)上將倍增管機構、電磁屏蔽筒、高低壓供電單元交流、電壓控制單元全部集成在一起基礎,使用方便;(2)光譜靈敏度高,暗電流小;(3)可根據(jù)測量光信號強度的不同還不大,通過程序調(diào)節(jié)控制電壓高產,自動調(diào)整測量系統(tǒng)的靈敏度。
2.2.2 信號采樣處理電路
光電倍增管輸出的電流信號可作為恒流源,將運算放大器作為負載電阻實現(xiàn)電流電壓的轉(zhuǎn)換良好, 信號處理電路,其輸出電壓U0=一gf~xf逐步顯現,式中g(shù)f為運算放大器的反饋電阻,反饋電阻Rf值的選擇要按光電倍增管陽極的大輸出電流單產提升、A/D采樣輸入滿量程值傳遞、運算放大器的開環(huán)增益等來確定試驗,同時還要考慮保證系統(tǒng)的高頻特性勞動精神。
輸出電路的小可測量電流受到運算放大器的偏置電流、溫飄製度保障、反饋電阻特性以及電路板的絕緣性能的影響預下達。
2.3 單片微機控制系統(tǒng)
這一部分主要負責溫度的采集、溫度的控制意見征詢、熒光信號的采集以及對光電倍增管控制極電壓的調(diào)整提升、外圍執(zhí)行機構(gòu)的驅(qū)動控制以及與上位計算機的實時通訊等。主要由微處理器的必然要求、A/D轉(zhuǎn)換芯片研究成果、通信接口芯片等組成。在該系統(tǒng)中完善好,微處理器采用P89C51微處理器大面積。該芯片具有并行可編程的非易失性FLASH程序存儲器。是80C51的派生器件問題分析,指令系統(tǒng)與80C51*相同培養,其主要特性為:
(1)速度可達32M;(2)片內(nèi)FLASH程序存儲器,可在線編程;(3)RAM 可擴展到65K字節(jié);(4)全雙工增強型UART~(5)4個8位I/O 口;(6)6個中斷源更加完善。上述特性可實現(xiàn)本系統(tǒng)所要求的實時檢測處理形式、控制、通訊等功能支撐作用。
A/D轉(zhuǎn)換芯片采用AD674日漸深入,該芯片是美國模擬器件公司(Analog Devices)生產(chǎn)的12位逐次逼近快速A/D轉(zhuǎn)換器。
片內(nèi)配有三態(tài)輸出緩沖電路同時,可直接與各種典型的8位或16位微處理器相連豐富內涵,而無須附加邏輯接口電路,且能與CMOS及1vrL電平兼容產能提升,并且片內(nèi)含有高精度的參考電壓源和時鐘電路適應性,這使它在不需要任何外部電路和時鐘信號的情況下完成一切A/D轉(zhuǎn)換功能,應(yīng)用非常方便通過活化。為了保證A/D采樣的準確性模擬信號輸入端可加采保器LF398落地生根。要注意的一點是與P89C51單片機接口電路設(shè)計時。單片機的時鐘一定要接12M及以上,防止因AD674數(shù)據(jù)總線傳輸速度快而造成時序不匹配有效保障。
2.4 驅(qū)動電路部分
考慮到風門電機大數據、磁吸開關(guān)、轉(zhuǎn)盤電機講實踐、加熱風扇等外圍執(zhí)行設(shè)施較多數字技術,而且要分別單獨供電,同時市場開拓,為了克服上述外設(shè)對微計算機系統(tǒng)可能造成的干擾知識和技能,就把這一部分單獨做成一塊驅(qū)動板,Roche_Light Cycler 480II熒光定量PCR儀由單片機系統(tǒng)I/O擴展口直接驅(qū)動光電耦合器件新模式,經(jīng)光電耦合器件的輸出端再加電流放大驅(qū)動實現。