ABI_7500熒光定量PCR儀操作方便顯著、運(yùn)行速度快科普活動、實驗結(jié)果準(zhǔn)確推動,從不常見設(shè)備變成分子生物學(xué)實驗室的基礎(chǔ)設(shè)備拓展基地。隨著PCR技術(shù)的成熟運(yùn)用效高性,多重擴(kuò)增越來越熱鬧逐漸完善,熒光定量PCR儀也不能幸免參與能力。該儀器發(fā)展到如今各個廠家都推出4通道、5通道甚至6通道熒光定量PCR儀是目前主流,眼花繚亂的選擇讓人無所適從研究,就有人一不小心走進(jìn)了“通道越多越好”的誤區(qū)。
在使用有些廠家5通道的熒光定量儀時應用創新,為了確保實驗結(jié)果的精確性和準(zhǔn)確性都要在實驗中使用ROX(一種熒光染料)或?qū)S玫腞eferencedye提高,這些熒光染料都必須單獨(dú)使用一個檢測通道。這樣以來的特性,真正能檢測多重PCR熒光信號的有效通道只有4個交流,而且使用校正染料可能會增加后期的使用成本。有的熒光定量PCR的檢測通道是只為自已廠家的專用的熒光染料或試劑開放的提供堅實支撐,有效檢測通道也絕非像宣傳資料中宣稱的那么多還不大。在購買前確認(rèn)熒光定量PCR儀器的有效檢測通道尤為重要,不能單單只聽宣傳信息化技術。
考慮多重ABI_7500熒光定量PCR儀的通道數(shù)的時候也應(yīng)該從實驗室實際情況出發(fā)發揮作用,多重PCR并非人人適用、人人可用逐步顯現,因為多重PCR必須要對退火溫度進(jìn)行優(yōu)化銘記囑托,在引物設(shè)計的時候就可能開始考慮能不能放在一個反應(yīng)體系內(nèi)進(jìn)行反應(yīng),不同的反應(yīng)需要的退火溫度不同自動化裝置,不合適的退火溫度會降低擴(kuò)增效率示範,放大非特異性擴(kuò)增應用前景,甚至擴(kuò)增不出來,它使實驗指數(shù)倍的復(fù)雜化了運行好。臨床上因為有試劑廠家專門針對某些疾病開發(fā)研制的多重檢測試劑盒首次,才需要用到3、4部署安排、5通道的檢測搖籃;科研用的熒光定量因為設(shè)計探針麻煩,基本上都用染料法推廣開來,基本上單通道就能滿足推動。