在
ABI_7500熒光定量PCR儀實(shí)驗(yàn)中不難發現，使用內(nèi)標(biāo)可以有效地進(jìn)行質(zhì)量控制實事求是，以下是使用內(nèi)標(biāo)進(jìn)行質(zhì)量控制的步驟：
1.內(nèi)標(biāo)的設(shè)計(jì)和選擇：設(shè)計(jì)一個(gè)特異性的內(nèi)標(biāo)是第一步進行探討，這個(gè)內(nèi)標(biāo)可以是基因組上的一個(gè)特定序列或者是一個(gè)已知的基因。這個(gè)內(nèi)標(biāo)的長度應(yīng)該與待檢測的基因組序列相當(dāng)責任製，以便于在同時(shí)進(jìn)行PCR反應(yīng)時(shí)十分落實，可以擴(kuò)增出與待檢測基因組大小相同的產(chǎn)物倍增效應。
2.內(nèi)標(biāo)加入的比例：標(biāo)的比例應(yīng)該與待檢測的基因組序列相同。這可以通過在反應(yīng)體系中同時(shí)加入內(nèi)標(biāo)和待檢測的基因組序列的引物和探針來實(shí)現(xiàn)製造業。
3.內(nèi)標(biāo)的擴(kuò)增：內(nèi)標(biāo)應(yīng)該與待檢測的基因組序列同時(shí)擴(kuò)增優化服務策略。這可以通過在反應(yīng)體系中同時(shí)加入內(nèi)標(biāo)和待檢測的基因組序列的引物和探針來實(shí)現(xiàn)。
4.內(nèi)標(biāo)的檢測：在結(jié)束后發展基礎，通過熔解曲線分析產(chǎn)物兩個角度入手，可以檢測內(nèi)標(biāo)是否正確地?cái)U(kuò)增。如果內(nèi)標(biāo)擴(kuò)增出了正確的產(chǎn)物同期，那么說明實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量控制是有效的生產效率。
5.內(nèi)標(biāo)的驗(yàn)證：在進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)，需要驗(yàn)證內(nèi)標(biāo)的擴(kuò)增效果效果。這可以通過對一系列已知濃度的內(nèi)標(biāo)進(jìn)行PCR反應(yīng)來實(shí)現(xiàn)使用。如果內(nèi)標(biāo)的擴(kuò)增產(chǎn)物符合預(yù)期的熔解曲線，那么就可以確認(rèn)內(nèi)標(biāo)是有效的密度增加。
6.內(nèi)標(biāo)的應(yīng)用：通過使用內(nèi)標(biāo)有效性，可以評估熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)的精密度和靈敏度。內(nèi)標(biāo)可以用于評估實(shí)驗(yàn)中的變異系數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差機遇與挑戰，從而確定實(shí)驗(yàn)的精密度廣泛關註。同時(shí)，通過使用內(nèi)標(biāo)還可以評估實(shí)驗(yàn)的靈敏度集成技術，因?yàn)閮?nèi)標(biāo)的濃度可以影響實(shí)驗(yàn)的線性范圍和檢測下限就能壓製。
